Coomassie ve diğer jel boyama ve leke çıkarma adımları son derece zaman alıcı ve zahmetli olabilir. Lekesiz Protein Etiketleme Reaktifi, tüm proteinler üzerindeki lizin amino asit yan zincirleriyle 10 dakika içinde bir jel içinde kovalent bağlar oluşturur. Lizin en bol bulunan amino asitlerden biri olduğundan, No-Stain reaktifi bir jel veya membran üzerindeki tüm proteinlerin saptanmasını sağlar ve kovalent olarak bağlı reaktiften gelen güçlü sinyal emisyonu nanogram düzeyinde hassasiyet sağlar.
Toplam protein normalizasyonu, temizlik proteinleri genellikle deneysel koşullardan etkilenebileceğinden, doğru, nicel western blot verileri elde etmek için yararlı bir yöntemdir. Invitrogen Lekesiz Protein Etiketleme Reaktifi, western blot verilerinin toplam protein normalizasyonu için hassas, lineer protein tespiti sağlayan jel transferinden sonra bir membrana uygulanan hızlı, kullanımı kolay, kovalent bir protein etiketleme reaktifidir. Invitrogen Lekesiz Reaktif, bir jeldeki proteinlerin görselleştirilmesi için hızlı, hassas bir jel boyası olarak da kullanılabilir.
No-Stain™ Protein Labelling Reaktifi Özellikler |
|
Reaksiyon Sayısı | Standart bir kit, 40 mini jel boyutunda membran veya 40 mini jel veya ikisinin bir kombinasyonunu etiketleyecektir. |
Reaksiyon Zamanı | 10 dk. |
Jel Uyumluluğu | Herhangi bir jel türüyle (prekast veya kendiniz dökün) veya jel kimyası (Bis-Tris, Tris-glisin, Tris-asetat, Trisin) ile uyumlu |
Membran Uyumluluğu | PVDF, nitrocellulose |
İmmünodeteksiyon Reaktifi Uyumluluğu | Kemilüminesans veya floresan tabanlı algılama ile tüm alt immün algılama adımlarıyla uyumludur |
Uyarma ve Emisyon Maksimumları | Uyarma: ~488 nm (epi mavi ışık), Emisyon: 590 nm |
Algılama Hassasiyeti | Bant Başına 20 ng |
Linear Aralık | Şerit başına 1 – 80 μg toplam protein yükü |
Görüntüleyici Gereksinimleri | UV veya floresan ışık kaynaklarına sahip çok çeşitli görüntüleyicilerle uyumludur, örneğin iBright FL1500 Görüntüleme Sistemi |
Nasıl Çalışır? | No-Stain Protein Etiketleme Reaktifi, tüm proteinlerde lizin amino asit yan zincirlerinin bir kısmı ile kovalent bağlar oluşturur |
Kit Bileşeni ve Saklama Koşulları | No-Stain Aktivatör (800 µL; saklama -20⁰C); No-Stain Türevleştirici (800 µL; saklama -20⁰C); No-Stain Etiketleme Tamponu, 20X (her biri 2 x 20 mL; depolama 15-30⁰C) |
Raf Ömrü | Üretim tarihinden itibaren 1 yıl |