SuperScript IV CellsDirect Lysis Reaktifleri, ilk izolasyon RNA'sı olmadan doğrudan bir memeli hücre lizatından birinci iplikli cDNA'yı sentezlemek için optimize edilmiştir.

• Çeşitli hücre tipleriyle uyumlu, kullanıma hazır, önceden karıştırılmış hücre parçalama solüsyonu
• Numune başına 1–10.000 hücre için optimize edilmiş performans; saflaştırılmış RNA'dan elde edilenlere eşdeğer sonuçlar

 

Hızlı Protokol ile Zamandan Tasarruf

SuperScript IV CellsDirect, güçlü bir SuperScript IV ters transkriptaz enzimi ve RNA'yı saflaştırma ihtiyacını ortadan kaldıran basitleştirilmiş bir cDNA sentezi iş akışı içerir. Tek bir tüpte bu temel yaklaşımla, pipetleme adımlarının ve manipülasyonların sayısını azaltarak RNA kaybı ve kontaminasyonunu önleyebilirsiniz. Sonuç, zamandan ve emekten tasarruf etmektir.







 

Üstün Hassasiyet ve Verim

SuperScript IV CellsDirect cDNA sentez kiti, rakiplerinden sürekli olarak daha iyi performans gösterir. Hela S3 hücreleriyle yapılan çalışmalarda, bir dizi hücre sayısı ve numune boyutunda duyarlıdır ve bol (ACTB), orta düzeyde bol (PGK1) ve düşük bolluk (BCL2) transkriptleri için daha fazla verim üretir.

Yüksek Çoklukta Gen Hedefi - ACTB

SuperScript IV CellsDirect cDNA sentez kiti, hedefe özel primerler kullanılarak bol miktarda bir transkript olan ACTB'den cDNA'yı sentezlemek için kullanıldı. Şekilde gösterildiği gibi rakiplerin kitlerine kıyasla üstün hassasiyeti ve verimi göstermektedir.

ACTB cDNA sentezi, bir SYBR yeşil tahlili ile analiz edilmiştir
 

ACTB'nin cDNA sentezi, bir SYBR Green tahlili kullanılarak analiz edildi. Numune başına 10 ila 10.000 hücre aralığını temsil eden bir HeLa S3 hücrelerinin seri dilüsyonu kullanılarak hücreler parçalandı ve her bir kit üreticisinin spesifikasyonlarına göre cDNA sentezlendi. Analiz, PowerTrack SYBR Green Master Mix kullanılarak yapıldı.	Verimi temsil eden CT farkının karşılaştırmasını gösteren çubuk grafik. Grafik, yüksek bolluk transkriptleri (ACTB) için hassasiyet ve verim gösteren yukarıda sunulan sonuçlardan aynı verileri kullanır.

 

Duyarlılık ve Verim-Düşük Çoklukta Gen Hedefi - BCL2

Düşük çokluk hedefleri için duyarlılığı ve verimi göstermek için hedefe özel primerler kullanılarak BCL2'den cDNA sentezlemek için SuperScript IV CellsDirect cDNA sentez kiti kullanıldı. Şekil 4 ve 5, rakip kitlere kıyasla HeLa S3 hücrelerinin (10 ila 10.000 hücre) tam 10 kat seyreltme serisi boyunca üstün hassasiyeti ve verimi göstermektedir.

SYBR yeşil testi ile analiz edilen BCL2 cDNA sentezi
 

BCL2'nin cDNA sentezi ve bir SYBR Green testi kullanılarak analiz edildi. Numune başına 10 ila 10.000 hücre aralığını temsil eden bir HeLa S3 hücrelerinin seri dilüsyonu kullanılarak hücreler parçalandı ve her bir kit üreticisinin spesifikasyonlarına göre cDNA sentezlendi. Analiz, PowerTrack SYBR Green Master Mix kullanılarak yapıldı.	Düşük bolluklu transkriptler (BCL2) için hassasiyet ve verim gösteren seyreltme serilerinde ürün ve rakip kitlerini gösteren yukarıdakiyle aynı verileri kullanan çubuk grafik.

 

Duyarlılık ve Verim-Orta Çoklukta Gen Hedefi- PGK1

Duyarlılığı ve verimi daha fazla göstermek için, hedefe özel primerler kullanılarak orta derecede bol bir gen hedefi olan PGK1'den cDNA sentezlemek için SuperScript IV CellsDirect cDNA sentez kiti kullanıldı. Şekilde gösterildiği gibi rakiplerin kitlerine kıyasla HeLa S3 hücrelerinin (10 ila 10.000 hücre) 10 kat seyreltme serisi boyunca duyarlılığı ve verimi göstermektedir.

 

PGK1'in cDNA sentezi ve bir TaqMan tahlili kullanılarak analiz. Numune başına 10 ila 10.000 hücre arasında bir numune boyutunu temsil eden HeLa S3 hücrelerinin seri 10 kat seyreltmesi kullanılarak hücreler parçalandı ve her bir kit üreticisinin spesifikasyonlarına göre cDNA sentezlendi. Analiz, TaqMan Fast Advanced Master Mix kullanılarak yapıldı.	Çubuk grafik, orta derecede bol transkript (PGK1) için hassasiyet ve verim gösteren seyreltme serilerinde ürün ve rakip kitlerini gösteren yukarıdakiyle aynı verileri kullanır.

 

Duyarlılık ve Verim - iPSC

SuperScript IV CellsDirect cDNA sentez kiti, İndüklenmiş Pluripotent Kök Hücreler (iPSC) dahil olmak üzere birçok hücre hattında düşükten yükseğe bir dizi gen için sürekli olarak rakiplerinden daha iyi performans gösterdi.

 

SuperScript IV CellsDirect cDNA sentez Kiti ile diğer ticari kitlerden (SuperScript III CellsDirect cDNA sentez Kiti (Invitrogen), SingleShot Probes Kit (Bio-Rad), FastLane Cell cDNA Kiti (Qiagen), RealTime hazır Hücre Lysis Kiti + Transkriptör Birinci Dizi cDNA Sentez Kiti (Roche) cDNA sentezi, liziz için 1000 insan iPSC kök hücre girişinden yapıldı ve TaqMan tahlilinde düşük ila yüksek ekspresyonlu çeşitli gen primerleri ile analiz edildi.

 

Doğrusallık

SuperScript IV CellsDirect cDNA sentez kiti, doğrusallık testleri sırasında sürekli olarak rakiplerinden daha iyi performans gösterdi.

İçerik&Saklama Koşulları

• SuperScript IV CellsDirect Lysis Solution, 9 mL
• SuperScript IV CellsDirect Stop Solution, 1.25 mL
• Lysis Enhancer, 250 µL

SSIV CellsDirect Lysis Solution 4°C'de saklanabilir. Diğer kit bileşenleri (Stop Solution, Lysis Enhancer) –20°C'de saklanmalıdır.

 

SuperScript™ IV CellsDirect™ Lysis Reagents Özellikleri
Örnek Tipi	Hücreler
Nakliye Koşulları	Kuru Buz
Ekipmanlarla Kullanım	RT-PCR (Endpoint), Real-Time PCR
Reaksiyon Sayısı	500 Reaksiyon
Test Sayısı	500 Reaksiyon
Ürün Grubu	SuperScript™
Ürün Tipi Özellikleri	Lysis Reagent
Reaksiyon Formatı	SuperMix veya Master Mix

Daha fazla bilgi için tıklayınız.