Kemilüminesan algılama, kimyasal reaksiyondan gelen enerji ışık şeklinde serbest bırakıldığında meydana gelir. Kaydedilebilir bir sinyal üretmek için gereken kemilüminesan reaksiyonları katalize eden en yaygın iki enzim muhabiri, yaban turpu peroksidaz (HRP) ve alkalin fosfatazdır (AP).
Gelişmiş kemilüminesans (ECL) substratları, tipik olarak stabil bir peroksit solüsyonu ve geliştirilmiş bir luminol solüsyonundan HRP substratlı sistemleridir. Çalışan bir yapmak için iki araçla birlikte çözüm. HRP-diğerkonjuge antikorların (veya probların) bağlı olduğu bir blonm'de ışık yayar ve bu ışık x-ışını filmi, CCD kamera kamera cihazları ve kemilüminesansı saptayan fosfor görüntüleyicilerle yakalanabilir. Işık üretimi sadece enzim-substrat reaksiyonu meydana gelir; bu artış, enzime yakın olan alt tabaka tükendiğinde, sinyalizasyon durur.
Yaban turpu peroksidaz enzimi (HRP) ile western blot için altı ipucu ECL substratı anlatıyoruz. Her biri, "western blot algılama sistemlerine karşılaştırmalı, doğruluğu ve süreyi çoğalmak için geliştiriciler içerir.
SuperSignal West Atto | SuperSignal West Pico Plus | SuperSignal West Dura | |
Ne zaman seçilmeli? | Hedef çok az miktarda, numune sınırlı veya antikorlar sınırlı | Günlük uygulamalar; temel seviye ECL üzerinde gelişmiş hassasiyet sunar | Kantitatif western blotlama veya maksimum sinyal süresi gerekir |
Özellikler | Yüksek hassasiyet | En geniş dinamik aralık | En uzun süre ve doğrusallık |
Hassasiyet | Düşük femtogramdan yüksek attograma | Düşük pikogramdan femtograma | Orta femtogram |
Süre | 6 saat | 24 saate kadar | 24 saat |
Önerilen antikor dilüsyonları (1 mg/ml stok) |
1°: 1:5,000 2°: 1:100,000-1:250,000 |
1°: 1:1,000 2°: 1:20,000-1:100,000 |
1°: 1:5,000 2°: 1:50,000-1:250,000 |
Katalog No | A38554 (20 mL) A38555 (100 mL) A38556 (200 mL) |
34579 (20 mL) 34577 (200 mL) 34580 (500 mL) 34578 (1 L) |
37071 (20 mL) 34075 (100 mL) 34076 (200 mL) |